期刊简介

               本刊创刊于1979年,是贵阳中医学院主办的贵州省唯一的综合性中医药学术性刊物。1987年起即为首批中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊),为《中文学术期刊(光盘版)》、《中国学术期刊综合评价数据库》、《中文科技期刊数据库》、《万方数据库》、《中文生物医学期刊文献数据库》等所收录。本刊普及与提高兼顾,理论与实践并重。主要报道中医药、中西医结合临床及科研等领域的新成果和新经验。                

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  • 杂志名称:贵阳中医学院学报杂志
  • 主管单位:贵阳中医学院
  • 主办单位:贵阳中医学院
  • 国际刊号:1002-1108
  • 国内刊号:52-5011/G2
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中)
贵阳中医学院学报杂志2012年第05期

一种L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒的构建及高效表达

肖静;杨元好;吴永国;唐娟

关键词:L-蛋氨酸γ-裂解酶, pGEX4T-2质粒, 逆转录PCR, 基因克隆
摘要:目的:拟通过构建人阴道毛滴虫的L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒,并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化表达产物,从而获得重组蛋氨酸裂解酶.方法:PCR法从人阴道毛滴虫的基因组中获得L-蛋氨酸γ-裂解酶获得L-蛋氨酸γ-裂解酶基因片段,并克隆至pGEX4T -2质粒,获得重组质粒,转化至大肠杆菌DH5α中,在异丙基-B-D-硫代半乳糖苷诱导下,实现高效表达,表达产物经亲和层析纯化获得重组L-蛋氨酸γ-裂解酶.结果:表达产物进行SDS - PAGE检测,结果表明在相对分子质量68000处出现高浓度的GST融合蛋白,相对分子质量与预期大小相符;薄层扫描显示重组蛋白占总菌量的33.6%.结论:人阴道毛滴虫的L-蛋氨酸γ-裂解酶质粒构建成功,并成功地获得高效表达.